Aplicación de la técnica cromogénica a la prueba de endotoxinas bacterianas

La técnica cromogénica se encuentra entre las tres técnicas que también contienen la técnica de gel-coagul y la técnica turbidimétrica para detectar o cuantificar endotoxinas de bacterias Gram-negativas mediante el uso de lisado de amebocitos extraído de la sangre azul del cangrejo herradura (Limulus polyphemus o Tachypleus tridentatus).Podría clasificarse como un ensayo cromogénico de punto final o un ensayo cinético-cromógeno según el principio de ensayo particular empleado.

El principio de reacción es el siguiente: el lisado de amebocitos contiene una cascada de enzimas serina proteasas (proenzimas) que pueden activarse mediante endotoxinas bacterianas.Las endotoxinas activan las proenzimas para producir enzimas activadas (denominadas coagulasa); esta última cataliza la división del sustrato incoloro, liberando un producto de color amarillo, pNA.El pNA liberado se puede medir fotométricamente a 405 nm.Y la absorbancia se correlaciona positivamente con la concentración de endotoxina, entonces la concentración de endotoxina podría cuantificarse en consecuencia.


Hora de publicación: 29-sep-2019