La prueba de endotoxinas bacterianas (BET) se realiza en la mayoría de los laboratorios modernos en condiciones controladas como factor importante para evitar interferencias.
Adecuadotécnica asépticaEs importante al preparar y diluir estándares y manipular muestras.vestirsepracticar fuera del equipo de protección personal normal del laboratorio (EPI) los requisitos no son una preocupación a menos que el producto bajo prueba exija consideraciones de seguridad específicas del analista debido a su toxicidad o infecciosidad.Guantesdebe estar libre de TALC, ya que el TALC puede contener niveles significativos de endotoxinas.Lectores de placas, baños de agua y bloques de calor seco.utilizado para la incubación de muestras debe estar en una mesa de laboratorio, lejos de conductos de calefacción, ventilación y aire acondicionado (HVAC), vibraciones significativas y tráfico de laboratorio que puedan afectar los resultados de la prueba.Muestra de tiempos y condiciones de esperadebe determinarse y posteriormente documentarse, si es necesario, para garantizar que se puedan generar resultados de prueba precisos en el tiempo calificado.
Por ejemplo, si el laboratorio recibe agua para inyección (WFI) o muestra en proceso, ¿debe refrigerarse o puede permanecer a temperatura ambiente y por cuánto tiempo?Antes de realizar la prueba, se recomienda mezclar adecuadamente los recipientes de muestra primarios antes de retirar las alícuotas de prueba para realizar pruebas directas o diluciones posteriores.
Prueba de endotoxina bacteriana Bioendo, los experimentos incluyenmétodo de coagulación en gelensayo de prueba de endotoxinas yensayo de prueba cuantitativa de endotoxinas, el ensayo de prueba de endotoxinas con método de coágulo de gel es una detección cualitativa de endotoxinas, este experimento requiere que los consumibles sean el procesamiento de despirogenación, como tubos de reacción libres de endotoxinas, tubos de dilución y puntas libres de pirógenos;la detección cuantitativa de endotoxinas tiene una prueba de endotoxina cromogénica cinética, una prueba de endotoxina turbidimétrica cinética, este experimento requiere que los consumibles cumplan con el nivel máximo de endotoxinas inferior a0,005 UE/ml(0,001 EU/ml), como tubos libres de endotoxinas, puntas libres de pirógenos y microplacas libres de pirógenos, incluso depósitos libres de pirógenos.Por cierto, si se trata de muestras, el contenedor debe ser una botella de muestra libre de endotoxinas.
En las pruebas de endotoxinas, la interferencia puede surgir de una variedad de fuentes, como componentes de la matriz de muestra, reactivos de prueba o equipos.
Para evitar interferencias en el experimento, se pueden tomar las siguientes medidas:
1. Preparación de la muestra: la preparación adecuada de la muestra es esencial para realizar pruebas de endotoxinas precisas.
La matriz de muestra debe probarse y optimizarse minuciosamente para garantizar la compatibilidad con el ensayo de endotoxinas.
En particular, las sustancias que interfieren, como lípidos y proteínas, deben eliminarse o minimizarse mediante técnicas apropiadas como la filtración o la centrifugación.
2. Controles positivos y negativos: Es esencial incluir controles positivos y negativos en el ensayo para monitorear interferencias.
Los controles positivos confirman la funcionalidad de la prueba, mientras que los controles negativos detectan cualquier contaminación o interferencia de los componentes del ensayo.
3. Control de calidad: Se debe realizar un control de calidad de todos los reactivos, equipos y agua utilizados en el ensayo.
Esto garantiza que los reactivos estén libres de contaminación por endotoxinas y funcionen correctamente.
4. Estandarización: El ensayo debe estandarizarse para garantizar que todos los resultados sean comparables y reproducibles.
Esto implica el uso de una curva estándar para calibrar el ensayo y el uso de técnicas estandarizadas para la preparación, incubación y detección de muestras.
5. Validación: El ensayo debe validarse para garantizar que sea específico, sensible y confiable.
Esto implica analizar una variedad de muestras, incluidas aquellas que se sabe que contienen endotoxinas, para determinar la exactitud y precisión del ensayo.
Si se siguen estas medidas, se pueden minimizar las interferencias y se pueden lograr pruebas de endotoxinas precisas.
Hora de publicación: 01-dic-2022
